当比色时OD值超过线性范围时,为什么不能直接稀释已经显色的样品,而必须改变取量重新显色,再测OD值

2025-01-19 23:27:43
推荐回答(2个)
回答1:

因为参加显色反应的物质浓度也影响了显色反应后OD值的线性。

要搞清楚:使得你的OD值超出线性范围的不是OD值本身过高,

而是你加的反应物浓度太高或太低,不能正常显色(虽然颜色可能是对的),超出了显色反应的线性。

一般机器OD大于1,线性就不行了。一点经验。

回答2:

可能是因为单纯稀释样品液会使其与对照液产生体积差,溶剂含量变高,由于对照样排除的只是原相同体积下的样品液在光照射下的反射折射散射等误差因素,而不是稀释后的样品液,最终导致无法起到对照效果。
若同时稀释对照液与样品液,则与标准溶液出现体积差,产生新变量。测OD值时虽然结果在线性范围内,但被测量如葡糖含量将不与OD值呈一元一次线性关系。
测OD值时要时刻保证引起样品液和对照液吸光度差异的因素只有被测量如葡糖含量。
以上均为个人看法,如有错误尽情指出。