发酵罐。管路的消毒工艺及操作流程

你问的问题太宽泛，要想得到满意的答复最好能具体点，比如你用的e.coli菌株、表达蛋白的一些情况、发酵规模、你想采用的工艺等等。
具体来说以下几个步骤是共有的：
1.种子（具体几级要看你的实际情况）最后一级一般接种量10%-15%
2.前期培养，根据工艺可以采用fbc或bc工艺方法，营养原则是不多不少。
3,.诱导阶段，此时以蛋白表达为主，碳源除了乳糖最好不要有其他的，氮源还是需要适当补加，另外诱导时间也是一个重要参数，这要结合你的工艺产品来确定。
4.放罐，最重要的考虑因素就是不要让菌种变衰老而自溶。
以上是我的浅见，有什么具体问题可以再探讨。

蒸汽原位灭菌的流程：
灭菌要进行空消和实消两步。空消是在投料前，对气路、料路、种子罐、发酵罐用蒸汽进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系统处于无菌状态。实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程，种子罐和发酵罐实消的操作过程相同。
空消过程中，维持蒸汽温度121℃左右，先开排污水阀和进气阀，排空夹套水，在对管路、滤器和种子罐发酵罐灭菌，空消时间大约为30到40分钟，当设备初次使用或者长期不用的情况下，最好采用间歇灭菌的方法，间歇灭菌指第一次空消结束后，间隔3到5个小时再空消一次，以便杀死芽孢。除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压，因此，蒸汽减压阀必须调整在0.13Mpa，不得超过0.15MPa。空消时，应将罐上的接种口、排气阀及料路阀门微微打开，使蒸汽通过这些阀门排出，同时保持罐压为0.13～0.15Mpa。空消结束后，应将罐内冷凝水排掉，并将排空阀门打开，防止冷却后罐内产生负压、损坏设备。空消时，溶氧、PH
电极取出，可以延长其使用寿命。
空消结束后，应尽快将配好的培养基从加料口加入罐内，此时夹套内应无冷却水。培养基在进罐之前，应先糊化，一般培养基的配方量以罐体全容积的70%左右计算(泡沫多的培养基为65%
左右，泡沫少的培养基可达75%～80%)，考虑到冷凝水和接种量因素，加水量为罐体全容积的50%
左右，加水量的多少与培养基温度和蒸汽压力等因素有关，需在实践中摸索。先开启机械搅拌装置，使罐内物料均匀混合，转速50～100rpm。打开夹套蒸汽阀、排汽阀，对罐内培养基预热，当罐内温度升到90℃时，关闭夹套进汽阀，打开罐内所有进汽阀，通入蒸汽。当罐温上升到105℃时，缓缓打开排汽阀，将罐顶冷空气排掉，持续五分钟后，关闭排汽阀。当罐压升至0.12Mpa，温度升到121～123℃时，控制蒸汽阀门开度，保持罐压不变，30
分钟后停止供汽。打开冷却水的进排阀门，在夹套内通水冷却，当罐内压力降至0.05Mpa
时，微微开启排气阀和进气阀，进行通气搅拌，加速冷却速度，并保持罐压为0.05Mpa，直到罐温降至接种温度。