在组织培养过程中,离体细胞对任何毒性物质都十分敏感。毒性物质包括解体的微生物及细胞残余物以及非营养的化学物质,因此对新采用和重新使用的培养皿等培养用品都要严格清洗和消毒。生物帮那里就有介绍的,我在那里看到过,你可以去查看一下。 【仪器、材料及试剂】1.仪器:超净工作台,干燥箱,高压锅,过滤器。2.材料:紫外灯,0.22μm微孔滤膜。3.试剂:75%酒精,0.1%新洁尔灭,高锰酸钾,重铬酸钾,浓硫酸。可以参考:please click to connect www.bio1000.com/zt/cell/214266.html . can help you【操作步骤】1.清洗(1)玻璃器皿的清洗步骤:按浸泡→刷洗→浸酸→冲洗等四步程序进行。①浸泡:新购进的玻璃器皿常带有灰尘,呈弱碱性,或带有铅、碑等有害物质,故先用自来水浸泡过夜、水洗,然后再用2%~5%盐酸浸泡过夜或煮沸30min,水洗。要领:培养用后的玻璃器皿要立即泡入清水中,使下道刷洗工作能顺利进行。用后的玻璃器皿常带有大量的蛋白质附着,干涸后不易刷洗掉,用后要立即用清水浸泡。②刷洗:用软毛刷、优质洗涤剂,刷去器皿上的杂质,冲洗晾干。要领:浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗涤剂去器皿上的杂质、刷洗次太多,会损害器皿的表面光洁度,洗涤剂有使pH上升的趋势,所以易选用软毛刷和优质洗涤剂。禁止用去污粉。因其中含有砂粒。会严重破坏玻璃器皿的光洁度。特别注意刷洗瓶角部位。酸浸之前要把洗涤剂冲干净。③浸酸:将器皿浸泡于清洁液24h,如急用也不得少于4h。清洁液由重铬酸钾、浓硫酸及蒸馏水配制而成,具有很强的氧化作用,去污能力很强。经清洁液浸泡后,玻璃器皿残留的末刷洗掉的微量杂质可被完全清除。④冲洗:先用自来水充分冲洗,吸管等冲流10min,瓶皿需每瓶灌满、倒掉,反复10次以上。然后再经蒸馏水漂洗3次,不留死角。晾干或烘干备用。对已用过的器皿,凡污染者必先经煮沸30min或放3%盐酸中浸泡过夜,未污染者可不需灭菌处理,但仍要刷洗、清洁液浸酸过夜,冲洗等。 清洁液的配制和使用注意事项1.清洁液(配方见表2-1)配方成分弱酸次强液强液重铬酸钾(g)清水(ml)浓硫酸(ml)硫酸浓度(v/v)501000908%100100016014%6020080080%①选用耐酸塑料桶或不锈钢桶配制为宜。②先将重铬酸钾溶于水(用玻璃棒搅拌助溶,有时不能完全溶解)。③缓缓加入浓硫酸,切忌过急,否则将产热而发生危险(绝不可将重错酸饵液倒入浓硫酸中)。④清洁液配好呈棕红色,待变绿色时表明失效。由于清洁液的腐蚀性极强,配制与应用时必须小心,并做好防护。
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太高深了,不懂得。很难!