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为什么在用试剂盒抽提质粒的时候加入溶液二后任然是浑浊的加入溶液三后没有沉淀！！

试剂盒是可用的。大肠杆菌形态是正常的

2025-04-02 11:37:38

推荐回答（2个）

回答1：

你溶液二加得不够，菌体量太多，裂解不开。可以多加点，当然，溶液三也要成比例地增加。

然后你检查下溶液二是否还能用，溶液二的主要作用物是NaOH和SDS，NaOH主要用来裂解，容易变质，还有SDS，溶液三形成沉淀主要是SDS的原因。

回答2：

首先先保证溶液二是否还可用，因为随着时间的延长，溶液的碱性会降低，这样就会降低裂解效率。其次保证溶液二的量足够，如果是DH系列的大肠杆菌，过夜培养后取1ml离心获得菌体，一般而言，溶液一加100微升-150微升，溶液二加200-300微升，溶液三加150-200微升，且溶液二和溶液三加入后需要冰浴3-5min。刚加入后要颠倒混匀，但是不能力量太大，否则质粒可能断裂。

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