利用展开剂判定。分别点样各组分对照品,用适当的展开剂展开混合物,再喷入显色剂,根据混合物薄层斑点的颜色,确定混合物中的物质,从而判定各组分在薄层上的位置。
根据固定相对各组分的吸附作用或溶解度不同的原理。吸附力弱或溶解度小的组分在固定相中分子运动较快,在薄层的上层。吸附力弱或溶解度大的组分在固定相中分子运动较慢,在薄层的下层。
扩展资料:
注意事项:
展开后的薄层板经过干燥后,常用紫外光灯照射或用显色剂显色检出斑点。对于无色组分,在用显色剂时,显色剂喷洒要均匀,量要适度。
紫外光灯的功率越大,暗室越暗,检出效果就越好,展开分离后,化合物在薄层板上的位置用比移值(Rf值)来表示。化合物斑点中心至原点的距离与溶剂前沿至原点的距离的比值就是该化合物的Rf值。
参考资料来源:百度百科-薄层色谱法
分别点样及各组分对照品,用适当的展开剂展开,再喷以适当的显色剂,然后看对照品斑点的位置所对应的样品在同一位置上是否显相同颜色的斑点,就可以判断该样品中是否含这种物质。也可以计算Rf值。
如果有发色基团,则采用荧光照射,用铅笔画出发光部分,即可;如果没有,则将板的边上裁下,随后采用碘、硫酸、高锰酸钾等各类方法之一进行显色。随后,刮取未显色板的等Rf部分,即可。荧光显色最好,其余的可能对化合物造成破坏,因此必须裁一小条显色。
基本原理
薄层色谱法利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。
薄层层析可根据作为固定相的支持物不同,分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。
以上内容参考:百度百科-薄层色谱法
根据固定相对各组分的吸附作用或溶解度不同,使吸附力弱或溶解度小的组分在固定相中一定能够得较快,即位置较高。判断吸附作用大小可根据极性强弱,判断溶解度则根据相似相溶原理即可。
是的,薄层色谱又叫TLC,操作的方法是:在点样板中放入原料(如果原料是固体需要用合适的溶剂溶解),在反应过程中,先用毛细管取原料,在薄板下方2毫米以上处点一下(点的水平位置视要点的式样个数决定,平均分配),再取反应液同样点在薄板上(上述的是同一块板),每个点代表什么式样要记好,然后放入爬板的容器里(容器中应在底部垫一层棉花,再倒入洗脱剂,洗脱剂的配制方法是石油醚:乙酸乙酯=7:1,倒入洗脱剂的量以刚好与底部的棉花平齐为好,薄板放入爬板容器时应直立,点样的位置朝下,大约几分钟后当液体上升到薄板的3/4或2/3时,拿出薄板,在紫外灯下可看到每个点样位置都有“东西”向上“爬”,如果反应液的位置的“东西”向上“爬”的和原料的一样高,则说明反应液中原料是剩余的,没有完全反应,重复此抄作,直至反应液的位置的“东西”不与原料一样高时,反应则终止。取样的时间视具体实验而定,一般为15分钟至一个小时不等。
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