楼上的一堆废话,估计哪里复制来的,告诉你一个很简单的办法,做一个标准曲线,5个标准品或者4个标准品,每个之间浓度相差10倍,然后根据得到的标准曲线计算你的斜率是不是接近3.3,越接近3.3,扩增效率就越接近100%,2.8~3.5之间都算可以了。一般的荧光定量PCR仪器有自动计算的功能,输入标准品浓度后,会计算出扩增效率是多少。
在做定量的时候,将你的模板按照倍比稀释,比如2倍或者10倍稀释,然后以每种浓度同事做一个定量反应,通常软件有专门的方法可以给你计算出效率的大小(通常在80-100%)。但是偶尔会出现110%的情况,这些都是在有效范围内,如果超过这个范围通常数据不可信。