(1)细胞大量分裂与生长与细胞分裂素和生长素是有关的.Ti质粒上的T-DNA中tms、tmr、tmt三组基因,使植物受伤部位细胞大量分裂与生长,说明能控制植物合成生长素、细胞分裂素,使植物患“肿瘤”.
(2)Vir基因被双子叶植物伤口部位细胞分泌的酚类化合物所激活,并能合成专切下T-DNA的限制酶.因此,Vir基因表达的产物可以将质粒上T-DNA,即图中的B.农杆菌在受到酚类化合物刺激后,才可以将T-DNA整合到受体细胞的染色体上.要想让农杆菌转化单子叶植物,只需要在单子叶植物的伤口处加入酚类化合物即可.
(3)图中的重组质粒并不含有Vir基因,但是在农杆菌体内含有另一个被改良的质粒含有Vir基因,依然可以表达出只切T-DNA的限制酶.因此烟草细胞的转化依然能够成功.
(4)改造后的Ti质粒时,外源基因加入到T-DNA中间,HindIII切割位点在T-DNA中间.EcoRI的切割位点在T-DNA中间和外侧,有两个切割位点,所以不可取.只需要HindIII 切割Ti质粒,插入外源基因.
(5)农杆菌转化法和其他转化方法仍然有多个技术缺点不能克服,如农杆菌转化法中目的基因整合到宿主细胞染色体上的位置是随机的,这会造成将宿主细胞相应的基因结构破坏或者引起突变.
故答案为:
(1)生长素、细胞分裂素
(2)B 在单子叶植物的伤口处加入酚类化合物
(3)另一个质粒含有Vir基因,仍能表达出产物切下T-DNA
(4)HindIII
(5)可能会引发插入部位基因突变、可能会是插入部位基因失效等