①未加石英砂，导致研磨不充分，使色素的提取量减少，①正确；②一次加入大量的无水酒精，使色素提取液浓度降低，②正确；③分次加入少量无水乙醇不影响色素的提取，③错误；④放置数天的菠菜叶叶片发黄，叶绿素含量减少，提取量也会减少，④正确．故选：D．
