浓缩DNA方法有哪些
提取DNA的具体步骤
1.破碎细胞,释放DNA
鸡血细胞中的DNA与核蛋白结合,位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下是不会释放出来的.为了使DNA从细胞核中释放出来,需要向鸡血细胞液中加入蒸馏水,并且搅拌,从而使血细胞膜和核膜胀破.用玻璃棒搅拌可以加速细胞的破裂.注意应沿一个方向快速搅拌,但也不能太快太猛,防止打碎DNA.一般5~10 mL的鸡血细胞液加入20 mL蒸馏水搅拌5 min.释放出来的大量DNA和RNA往往与蛋白质结合在一起,应用3~4层纱布进行过滤,除去一些颗粒较大的杂质.
2.溶解细胞核内的DNA
在浓度较高的NaCl溶液中核蛋白容易解聚,游离出的DNA溶解在溶液中.在溶液中加入两倍体积的浓度为2 mol/L的NaCl溶液,搅拌1 min.注意应沿一个方向搅拌,使DNA充分溶解.
听我师姐说他们用BIOG 离心法提取样本DNA,再用Qubit 测RNA的浓度,楼主如果需要浓缩质粒DNA可以用3倍体积的无水乙醇、0.1体积的NaAC和1ul 15mg/ml的glycogen沉淀进行浓缩。