如何判断悬浮细胞培培养时,细胞是死细胞还是活细胞:
死亡细胞分为坏死和凋亡,两种死亡方式的形态结构不相同:
坏死主要是致病因素引起的,凋亡属于细胞程序性死亡。
坏死细胞先后出现:核固缩,核碎裂,核溶解,细胞嗜酸性增强,胞膜破裂,细胞内容物弥漫出来,属于酶融性死亡。
凋亡细胞的特点是出现凋亡小体(有完整细胞膜),细胞内物质没有露出,最后被吞噬细胞吞噬。
正常细胞肯定会有完整的细胞核,以及各种正常细胞器。
正常细胞镜下观察形态分明,饱满透亮,死亡细胞会皱缩破损,暗淡。
如何判断悬浮细胞培培养时,细胞是死的还是活的
将在动物细胞凋亡研究中应用的Hoechst-PI双重荧光染色 法与琥珀酸脱氢酶(SDH)染色法相结合,建立了一种更加完善的、能同时鉴别和研究悬浮培养的植物细胞凋亡及坏死的新方法——Hoechst-PI- SDH三重染色法(H-P-S法)。该方法可直接用于红豆杉悬浮培养细胞,无需对细胞进行去壁、固定及切片等其它方法所必需的步骤,在荧光显微镜下可鉴别 活细胞、死细胞及凋亡细胞,并可同时观测细胞凋亡的全部过程。该方法简单、快速、准确,而且克服了因细胞膜通透性差异引起的对死、活细胞判断的困难,可在 植物细胞凋亡的研究中广泛应用。