如何获得基因上游5'调控区的序列
一、掌握基因表达(gene expression)的定义及概念:基因表达是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经转录、翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。必须明确并非所有基因的表达过程都产生蛋白质,rRNA和tRNA编码基因转录生成RNA的过程也属于基因表达。
二、熟悉基因表达的几种主要模式:①组成性表达(constitutive gene expression)和管家基因(housekeeping gene);②诱导性表达(inducible gene expression)。
组成性表达指在一个生物生命的全过程中以及一个个体的所有细胞类型中均持续表达,很少受环境因素影响的基因,通常还把他们称为“管家基因”。诱导性表达指某些基因 的表达极易受环境变化的影响,在特定环境信号的刺激下,有的基因表达开放或增强;有的 基因表达关闭或下降。根据环境诱导物的不同,又可具体分为可诱导的表达(inducible expression)、可阻遏的表达(repressible expression)和协调(coordinance expression)表达。
三、熟悉基因表达调控的概念:指相同的结构基因并非在各种细胞中同时表达,而是根据机体生长、发育、繁殖的需要,随着环境的变化,有规律的选择性、程序性、适度的表达以适应环境,发挥其生理功能,这个调节的过程称之为基因表达的调控。
整个基因表达的过程是分阶段的,如基因活化、转录、转录后加工、翻译、翻译后加工等,因此基因表达的调控也是在多级水平上进行的。
四、了解转录水平的调控是基因表达调控的基本控制点,涉及到特异的DNA序列、调节蛋白、DNA-蛋白质/蛋白质-蛋白质的相互作用,RNA聚合酶的活性调节等方面。他们可以归结为以顺式和反式作用两大类调节模式。
五、熟悉基因表达的组织/细胞/空间特异性(tissue /cell /spatial specificity)和时相/阶段特异性(temporal/stage specificity)。
1 原核生物的基因表达调控