PCR的主要质量是由引物决定的,与中间结构关系不大。可能的原因有两个:1. 引物匹配区内可能含有高度重复序列2. 引物可能与模板上的其他序列有非特异性互补因此建议:1. 用软件重新检查引物序列的质量,避开重复、非特异性互补序列2. 在能扩增出条带的范围内,选择最高最火温度以增强特异性3. 使用长链高保真(Long and accurate, LA)聚合酶。
还是和酶有关吧。换进口的试试