SSR锚定引物是指什么,有不锚定的引物吗?

2024-12-03 15:24:39
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回答1:

所谓锚定一般在第一次的引物的基础上后退部分碱基再设计的引物,所以锚定引物连在5’端或者3’端就好理解了.可以参考下面内容对锚定引物的应用.

1. 差异显示技术(mRNA differential display reverse transcription chain reaction, DDRT-PCR) 指在不同的生长时期、在个体的发育与分化的不同阶段、在生物体对疾病的反应以及不同的环境下调控基因的表达是不同的,这就是基因的差别表达(differential expression)。原理:利用两组特殊的引物对差别表达的基因进行扩增。3’端引物:利用mRNA的poly A尾巴设计。根据mRNA结构分析知道,poly A尾巴之前的两个碱基只有12种可能的排列组合:根据这12种排列组合,设计12种不同的引物,这样就将所有mRNA分成了12组。这些引物由11~12个T及两个其它的碱基组成,用通式5’-T11MN或5’-T12MN表示,M为A、G、C的任一种,N为A、G、C、T的任一种。这种引物称锚定引物。5’端引物:5’端为10个碱基(10-mer)组成的随机引物。每一个随机引物都可能与总mRNA中的某一些分子发生杂交,杂交位点也可能在mRNA的不同位点上。用一种3’锚定引物和一种5’随机引物进行扩增,可获得50~100条100~500bp的DNA扩增带。为了要寻找更多的DNA差异带,应使用全部的12种锚定引物以及尽可能多的5’随机引物。

回答2:

什么是锚定引物 锚定引物是在扩未知序列(RACE或genome walking)时,与未知序列一侧结合的引物,基本都是试剂盒里自带的