A、为防止其他杂菌对实验的影响，因此配制的培养基必须高温灭菌后才能进行接种，A正确；B、细菌真菌的生长需要适宜的温度，因此接种后的培养皿一般放在恒温箱或温暖的地方培养，B正确；C、细菌真菌的生活需要有机物，因此配置的培养基一般加入琼脂和营养丰富的有机物，C正确；D、接种前不能打开培养皿，以防止空气中的细菌真菌落入，D不正确．故选：D．
