如果你种子菌液新鲜没问题的话，一定是培养基出了问题，比如忘记某种成分或者忘记调节pH。不在于你用涂布还是划线方法。建议 重新配制培养基。
你用涂布法试试看，不用划线法，用玻璃把菌液均匀涂布在整个培养皿上，过24小时观察
