高效液相色谱法流动相如何设置比例

流动相比例设置与什么有关系，这方面亟待提高。。。

2025-02-11 21:15:22

推荐回答（5个）

回答1：

1、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。

2、流动相与样品不产生化学反应。

3、流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低柱压降，延长泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。

4、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。

5、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。

扩展资料

高效液相色谱法有“四高一广”的特点：

1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。

2、高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。

3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。

4、高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。

5、应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。

6、柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物。

7、样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。

参考资料来源：百度百科-高效液相色谱

参考资料来源：百度百科-流动相

回答2：

1、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。

2、流动相与样品不产生化学反应。

3、流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低柱压降，延长泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。

4、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。

5、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。

液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：

（1）流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。

（2）流动相与样品不产生化学反应

（3）流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低柱压降，延长泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。

（4）流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。

（5）流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。

（6）在流动相配制好后，一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用

参考资料：

百度百科-高效液相色谱

百度百科-流动相

回答3：

流动相的比例，是有根据的。主要看你流动相的组成成分，一般来说，如果要分离的成分出峰时间较快，那么流动相中有机相就相对要少！总之只要能使样品峰的分离度（大于1.5）、理论塔板数(根据实际情况而定)、峰拖尾因子(0.95~1.05之间)达到要求的比例就行。建议朋友有问题，可到分析测试百科网去提问，基本上问题都能得到解答，百度上搜下就有。

比例是可调的，到达最佳效果就好可以去多看看有关色谱条件优化方面的资料。

回答4：

流动相的比例与柱子的性能、你所需要的保留时间以及样品的区分度有关系，这个要是具体情况而定。

回答5：

与样品有关系啊，就是让流动相让样品有一个合适的分离度

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