基因扩增实验室缓冲间要有什么设施

2025-02-16 14:26:26

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回答1：

1、主体结构：
目前实验室主体彩钢板、铝合金型材室内所阴角、阳角均采用铝合金R50内圆角铝解决容易污染、积尘、易清扫等问题并且彩钢板结构牢固线条简明美观密封性
2、标准四区隔气压调节：
PCR程试剂准备、标本制备PCR扩增区及产物析检测区四独立实验区整区域整体缓冲走廊每独立实验区设置缓冲区同各区通气压调节使整PCR实验程试剂标本免受气溶胶污染并降低扩增产物员环境污染
3、消毒：
四实验区四缓冲区顶部及传送窗内部安装紫外灯供消毒用
试剂准备区标本制备区设置移紫外线灯实验桌进行局部消毒
4、机械连锁锈钢传递窗：
试剂标本通机械连锁锈钢（建议使用电连锁式）传递窗传递保证试剂标本传递程受污染（物流）
5、面
面建议使用PVC卷材面或自流坪面整体性便于进行清扫耐腐蚀没条件采用水磨石面或块瓷砖（至少800mm×800mm）接缝需要于2mm
6、照明
灯具要选用净化灯具能达便于清洗、积尘特点
另外：
?PCR实验室两功能工作区域：核酸扩增前区核酸扩增区核算扩增前区包括试剂准备间本制备间两房间各自独立能现空气互通两房间相外界气压呈压状态核酸扩增区包括扩增区产物析区使用实荧光PCR仪、HIV病毒载量测定仪PCR实验室两区域合并房间区域两房间两房间必须各自独立能现空气互通核算扩增区外界气压呈负压状态
?PCR实验室根据使用仪器功能合理设置各工作区域采用聚合酶联反应：则设置试剂储存准备区、标本制备区、扩增区、扩增产物析区四单独工作区域用区式品需要粉碎处理需增设品粉碎区；若使用实荧光PCR：基扩增区、基产物析区合并房间内；采用标本处理、核酸提取及扩增检测体全自化PCR析仪则标本制备区、扩增区、扩增产物析区合并区域PCR实验室原则设置五区或四区或三区或二单独工作区
?核酸扩增前区核酸扩增区设房间内必须满足列要求前提：
核酸扩增前区实验室内设置两同位置实验区试剂配置超净工作台操作品处理物安全柜内操作
核酸扩增区使用全封闭扩增检测系统实荧光PCR仪等
每实验员使用各自试剂、耗材、移液器盛放污染物盛器
实验前操作区域共享器具进行清洁及消毒
各区域试剂、器具、仪器设备该区专用交叉使用
三、空气流与压差要求
PCR实验室空气流向必须严格按照试剂储存准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物析区空气压力逐渐递减式进行防止扩增产物顺空气气流进入扩增前区域风速流向混乱
保证房间内压差避免污染应空调面板处写清楚送风机排风机启顺序关闭顺序先顺序混乱
空气洁净级别同相邻房间间静压差应于5帕洁净室(区)与室外气静压差应于10帕应配备监测静压差设备并定期监控
般情况试剂配制室及品处理室宜呈微压防外界含核酸气溶胶空气进入造污染；通控制进风风量于排风风量达压效
核酸扩增室及产物析室应呈微负压防含核酸气溶胶扩散污染试剂与品通控制排风风量于进风风量达负压效
理想情况PCR实验室缓冲间内设置压使室内空气流向室外室外空气流向室内 PCR实验室进风由原央空调控制要求央空调风口安装指定定点

四、实验室面积及设备间距
般说各房间面积没严格要求需能放置所需仪器设备并且便于员操作即物安全柜房间面积能于10平米并且每增加台物安全柜房间要增加10平米
各实验室缓冲间面积般1300*（1300或1500）mm宜并且缓冲间面积能于实验室房间面积1/8
做平面设计候首先要考虑素安全实验室易发爆炸、火灾、毒气泄露等场所我做平面设计候应尽量要保持实验室通风流畅、逃通道畅通根据际体工程标准我做划供参照：
实验台与实验台通道划标准(通道间隔用L表示)
L>500mm边站操作；
L>800mm边坐操作；
L>1200mm边坐边站间;
L>1500mm两边坐间；
L>1800mm两边坐间仪器
平台、仪器台宜离墙太近离墙400mm宜工作发危险易于疏散实验台间道应全部通向走廊另:实验室建筑层高宜3.7米-4.0米宜净高宜2.7米-2.8米洁净度、压力梯度、恒温恒湿等特殊要求实验室净高宜2.5米-2.7米（包括吊顶）；实验室走廊净宽宜2.5米-3.0米.普通实验室双门宽1.1米-1.5米(称门)宜,单门宽0.8米-0.9米宜

五、洁净装修要求
洁净室（区）内表面应平整光滑、裂缝、接口严密、颗粒物脱落并能耐受清洗消毒墙壁与面交界处宜弧形或采取其措施减少灰尘积聚便于清洁
洁净室(区)内各种管道、灯具、风口及其公用设施设计安装应考虑使用避免现易清洁部位
洁净室(区)窗户、棚及进入室内管道、风口、灯具与墙壁或棚连接部位均应密封
六、工作服要求
净化车间内工作员应穿着符合要求工作服工作服选材、式及穿戴式应与产操作空气洁净度级别要求相适应并混用洁净工作服质应光滑、产静电、脱落纤维颗粒性物质菌工作服必须包盖全部毛发、胡须及脚部并能阻留体脱落物同空气洁净度级别使用工作服应别清洗、整理必要消毒或灭菌工作服洗涤、灭菌应带入附加颗粒物质工作服应制定清洗周期
进入各区域必须严格按照单向进行同工作区域使用同工作服（例同颜色）工作员离工作服带
实验室应建立、执行员进洁净区清洁程序管理制度员清洁程序合理
七、流路径与物流路径
进入实验室区域工作员应该按照路径：
公共清洁区——更衣间（更换洁净服）——缓冲间——污染实验区
工作员退实验室路径：
污染试验区——缓冲间——淋浴间（条件设置）——更衣间——公共清洁区
所物品进入实验区必须经双扉互锁传递窗利用传递窗消毒才进入实验室内所物品必须经传递窗才传递实验室外清洁公共区
八、门启向
实验室建筑层高宜3.7米-4.0米宜PCR实验室净高宜2.5米-2.7米（包括吊顶）；实验室走廊净宽宜2.5米-3.0米.普通实验室双门宽1.1米-1.5米(称门)宜,单门宽0.8米-0.9米宜
般实验室门主要向危险房间房门应朝外房门材质选择压力玻璃
压差梯度房间门启向应朝向压向侧启；
考虑消防安全于些主要逃门启向应朝向清洁区向启
九、基本仪器设备考虑
(1)试剂贮存准备区
该实验区主要进行操作贮存试剂制备、试剂装主反应混合液制备试剂用于品制作材料应直接运送至该区经其区域试剂原材料必须贮存本区内并本区内制备所需贮存试剂与气流压力控制本区应外界保持微压
试剂准备区仪器设备主要应加器、冰箱、平、低速离机、混匀器、移紫外灯等使用超净工作台作试剂配制操作台面
(2)标本制备区
该区域主要进行操作本保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管测定DNA合本区压力梯度要求：相于邻近区域压避免邻近区进入本区气溶胶污染另外由于加操作能发气溶胶所致污染所应避免本区内必要走
标本制备区仪器设备主要应物安全柜（B2避免提取核酸柜内反复循环造标本间交叉污染现假阳性结外应配备加器、台式高速离机（冷冻及温）、台式低速离机、恒温设备（水浴/或干浴仪）、冰箱、混匀器移紫外灯等
(3)扩增扩增产物析区
　　该区域主要进行操作DNA扩增扩增片段测定外已制备DNA模板(自本制备区)加入主反应混合液(自试剂贮存制备区)制备反应混合液等本区内进行本区压力梯度要求：相于邻近区域负压避免气溶胶本区漏避免气溶胶所致污染应尽量减少本区内必要走别操作加等应超净台内进行
扩增区主要仪器核酸扩增热循环仪（PCR仪实荧光或普通）热循环仪电源应专用并配备稳压电源或UPS防止由于电压波扩增测定影响外根据工作需要配备加器、超净台等
产物析区：本区所使用仪器设备能加器、电泳仪（槽）、电转印仪、杂交炉或杂交箱、水浴箱、DNA测序仪、酶标仪洗板机等

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